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阪崎克羅諾桿菌單克隆抗體的制備及其間接競爭-ELISA檢測方法
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 183 發(fā)表時間: 2017-10-10
作者: 翟緒昭,曾海娟,王廣彬,董慶利,謝曼曼,丁承超,劉武康,王淑娟,李杰,劉箐
關(guān)鍵詞: 阪崎克羅諾桿菌;單克隆抗體;間接競爭ELISA
摘要:

以阪崎克羅諾桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 29004免疫BALB/c小鼠,采用雜交瘤細胞技術(shù),經(jīng)過兩次細胞融合共制備出7 株分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞株(1E9、2A7、2D10、3E5、5B10、6E3、12A2)。其中2A7、2D10、3E5、12A2的效價達到了1∶256?000,6E3的效價為1∶128?000,5B10的效價為1∶64?000,1E9的效價為1∶32?000。亞型鑒定結(jié)果顯示1E9的亞型為IgG1,6E3的亞型為IgG2b,其余抗體2A7、2D10、3E5、5B10、12A2的亞型均為IgG2a。對7?株抗體進行特異性檢測結(jié)果顯示,2A7能與3?株阪崎克羅諾桿菌(ATCC?29004、ATCC?29544、ATCC?12868)都結(jié)合,1E9能與其中兩株(ATCC?29004、ATCC?12868)結(jié)合,且與其他11?株類似菌和常見致病菌交叉反應(yīng)結(jié)果顯示7?個抗體均有良好的特異性。用2A7建立的間接競爭酶聯(lián)免疫吸附測定法對阪崎克羅諾桿菌的檢測靈敏度可達到106?CFU/mL。

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