目的:根據(jù)熒光共振能量轉(zhuǎn)移(fluorescence resonance energy transfer,F(xiàn)RET)的原理,構(gòu)建一種基于上轉(zhuǎn)換熒光納米材料的新型免疫標(biāo)記熒光猝滅試紙條檢測(cè)牛奶中的獸藥磺胺喹惡啉(sulfaquinoxaline,SQX)殘留。方法:通過(guò)熱分解方法合成上轉(zhuǎn)換納米熒光材料,通過(guò)檸檬酸三鈉還原法制備膠體金納米顆粒。將合成的上轉(zhuǎn)換熒光顆粒固定在試紙條C線上,并將上轉(zhuǎn)換熒光顆粒與SQX包被抗原的混合物固定在T線上,將膠體金標(biāo)記的SQX單克隆抗體噴涂在金標(biāo)墊上。滴加樣品后,隨著樣品液的流動(dòng),金標(biāo)抗體會(huì)移動(dòng)到T線處并與SQX包被抗原結(jié)合,這種結(jié)合會(huì)導(dǎo)致抗體上的納米金顆粒(受體)與T線上的上轉(zhuǎn)換顆粒靠近(供體),從而發(fā)生FRET,產(chǎn)生熒光猝滅。在980?nm激發(fā)器激發(fā)波長(zhǎng)下通過(guò)目測(cè)檢測(cè)熒光強(qiáng)弱變化,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)SQX的檢測(cè)。結(jié)果:該免疫熒光猝滅試紙條檢測(cè)SQX的方法檢測(cè)限為1?μg/L,牛奶樣品的檢測(cè)限為8?μg/L。整個(gè)檢測(cè)過(guò)程不超過(guò)15?min。結(jié)論:該方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、檢測(cè)時(shí)間短、結(jié)果易于判斷,可以滿足牛奶中SQX殘留的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的要求。
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