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利用易錯PCR構(gòu)建醬油釀造用T酵母spt15突變庫
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 145 發(fā)表時間: 2019-09-26
作者: 趙秀麗,張毓秀,孫月芹,侯麗華
關(guān)鍵詞: 易錯PCR|spt15|基因突變庫|篩菌|醬油發(fā)酵
摘要:

為得到醬油釀造優(yōu)良性狀的微生物,對醬油釀造用T酵母進行研究。首先利用易錯聚合酶鏈式反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)技術(shù)構(gòu)建spt15(可編碼TATA結(jié)合蛋白)的突變基因庫,然后重組于表達載體YEplac195中,并導(dǎo)入尿嘧啶營養(yǎng)缺陷型菌株W303和WM2中篩選。結(jié)果表明:在不同鹽質(zhì)量分數(shù)的固體培養(yǎng)基中經(jīng)篩選獲得4?個最佳突變菌株,其具有耐鹽優(yōu)勢,在醬油發(fā)酵中可產(chǎn)生較高的氨基酸態(tài)氮。經(jīng)PCR產(chǎn)物測序可知,重組質(zhì)粒中目的基因的序列有堿基的增添、缺失和替換。

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