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麥胚降血糖肽的分離純化及鑒定
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 125 發(fā)表時間: 2019-09-26
作者: 顏輝,張琦,江明珠,朱勝虎,聶旭東,余永建,張佳鑫,賈俊強,熊孟
關(guān)鍵詞: 麥胚|降血糖多肽|α-葡萄糖苷酶|分離純化|結(jié)構(gòu)鑒定|動物實驗
摘要:

建立麥胚降血糖肽的分離純化方法及鑒定活性多肽的結(jié)構(gòu)組成。采用胰蛋白酶酶解麥胚蛋白,得到降血糖多肽,并進行降血糖動物實驗。超濾獲得高活性組分,離子交換吸附實驗選擇最佳的樹脂,并對麥胚降血糖肽進行離子交換吸附分離,SephadexG-25和SephadexG-15分離,再經(jīng)過反相高效液相色譜(reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)分離高活性成分。最后采用高效液相色譜-電噴霧-質(zhì)譜(HPLC-electrospray ionization-mass spectrometry,HPLC-ESI-MS)鑒定活性多肽的結(jié)構(gòu)組成。結(jié)果顯示酶解麥胚蛋白對α-葡萄糖苷酶的抑制性IC50為10.98?mg/mL,能夠緩解糖尿病小鼠的癥狀。超濾獲得分子質(zhì)量小于5?kDa的高活性組分,IC50為1.60?mg/mL。732型陽離子交換樹脂的分離效果最好,2.5%氨水的洗脫率為98.13%,通過動態(tài)離子交換吸附分離后,活性顯著提高,IC50為0.30?mg/mL。通過SephadexG-25和SephadexG-15分離得到高活性組分,經(jīng)RP-HPLC分離得到8?個組分(峰),其中1號峰的活性和含量都最高,IC50為0.098?mg/mL。HPLC-ESI-MS結(jié)果顯示m/z?274.45的豐度比較高,經(jīng)離子碎片拼接,共有7?種多肽,其中二肽有1?種,三肽有6?種。本研究對于開發(fā)具有降血糖功效的新型功能性食品有一定的作用。

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