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短小芽孢桿菌HN-10抗菌肽的分離純化及其抗粉紅單端孢活性
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 152 發(fā)表時間: 2019-09-26
作者: 嚴(yán)海嬌,贠建民,白杰,郭娟,鄧展瑞,李多佳
關(guān)鍵詞: 抗菌肽|短小芽孢桿菌HN-10|分離純化|粉紅單端孢
摘要:

長期大量使用殺菌劑不但會導(dǎo)致病原微生物產(chǎn)生耐藥性,同時也存在著嚴(yán)重的環(huán)境和健康風(fēng)險,因此開發(fā)不易產(chǎn)生耐藥性的新型抗菌物質(zhì)非常重要。本實驗采用硫酸銨沉淀、AB-8大孔吸附樹脂、Sephadex G-100凝膠和半制備型反相高效液相色譜對短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)HN-10發(fā)酵液進(jìn)行逐級分離純化,以粉紅單端孢(Trichothecium roseum)為指示菌,測其抑菌活性,并通過基質(zhì)輔助激光解析串聯(lián)飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜對純化后的活性物質(zhì)進(jìn)行氨基酸序列分析。結(jié)果表明,經(jīng)純化后得到一種抗真菌肽P-1,其氨基酸序列為G-G-S-G-G-G-S-S-G-G-S-I-G-G-R,分子質(zhì)量為1?149.14?Da。經(jīng)抑菌實驗可知,抗真菌肽P-1在最小抑菌濃度為1?μg/mL時可抑制粉紅單端孢生長。經(jīng)ProtParam軟件分析得到P-1理論等電點為9.75,帶有1?個正電荷數(shù)。在NCBI數(shù)據(jù)庫和APD數(shù)據(jù)庫檢索,與之序列相似性最高的僅為45%,因此判斷這是一種新型抗真菌肽。抗真菌肽P-1抑菌效果良好,可為開發(fā)新型生防制劑提供理論依據(jù)。

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