為研究胡桃醌對大腸桿菌的抗菌活性及其作用機(jī)理,用不同質(zhì)量濃度胡桃醌處理大腸桿菌,分別對最小抑菌質(zhì)量濃度(minimal inhibitory concentration,MIC)、生長曲線、細(xì)胞膜相對電導(dǎo)率、熒光發(fā)射光譜等進(jìn)行測定,并進(jìn)行生物膜形成和細(xì)胞活性分析、十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)以及大腸桿菌基因組合成分析。結(jié)果表明,胡桃醌對大腸桿菌具有有效的抗菌活性,MIC為0.062 5 mg/mL。經(jīng)不同質(zhì)量濃度胡桃醌處理后大腸桿菌細(xì)胞膜相對電導(dǎo)率升高,表明胡桃醌破壞了大腸桿菌膜的完整性,增加了細(xì)胞膜的通透性。熒光發(fā)射光譜分析結(jié)果表明,胡桃醌能夠與膜蛋白相互作用從而改變大腸桿菌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)。結(jié)晶紫和刃天青染色實驗結(jié)果表明胡桃醌能夠通過抑制大腸桿菌生物膜的形成減弱大腸桿菌的呼吸作用,進(jìn)而抑制其活性。SDS-PAGE和大腸桿菌基因組合成分析結(jié)果顯示胡桃醌可抑制大腸桿菌中蛋白質(zhì)、DNA和RNA的表達(dá)。通過分子對接實驗可知,胡桃醌可以結(jié)合到基因組DNA的凹槽上,改變其二級結(jié)構(gòu)和形態(tài)。綜上,胡桃醌對大腸桿菌具有較好的抑制效果,可以作為一種天然抗菌劑用于食源性大腸桿菌的防控中。
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