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灰褐鏈霉菌與黃色短桿菌屬間原生質(zhì)體融合提高ε-聚賴氨酸產(chǎn)量
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 158 發(fā)表時(shí)間: 2019-06-11
作者: 李 樹,杜宗軍,陳冠軍
關(guān)鍵詞: ε-聚賴氨酸;內(nèi)源性賴氨酸;屬間融合;發(fā)酵
摘要:

為提高灰褐鏈霉菌(Streptomyces griseofuscus LS-6)的ε-聚賴氨酸(ε-poly-lysine,ε-PL)發(fā)酵水平,從增加內(nèi)源性前體賴氨酸角度考慮,將S. griseofuscus LS-6與賴氨酸生產(chǎn)菌株黃色短桿菌(Brebvibacterium flavum S62)進(jìn)行屬間的原生質(zhì)體融合。以S. griseofuscus LS-6產(chǎn)黑色素作為遺傳標(biāo)記挑選到1 株融合子LS-32,其ε-PL搖瓶產(chǎn)量為2.82 g/L,是親本菌株LS-6的1.73 倍;LS-32在補(bǔ)料分批發(fā)酵中的ε-PL產(chǎn)量達(dá)到56.4 g/L,比親本提高了38.9%。隨機(jī)引物擴(kuò)增多肽DNA技術(shù)顯示融合子LS-32中確實(shí)有來自B. flavum S62的基因;融合子ε-PL代謝途徑中關(guān)鍵酶的活力(己糖激酶、天冬氨酸激酶、ε-PL合成酶等)和胞內(nèi)氨基酸含量(賴氨酸、谷氨酸、精氨酸等)均高于親本,是LS-32高產(chǎn)ε-PL的重要原因。本研究明確了內(nèi)源性賴氨酸對(duì)于提升ε-PL產(chǎn)量的重要性,且屬間融合為ε-PL產(chǎn)生菌的育種研究提供了新的參考途徑。

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