領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
隨著細(xì)胞培育肉產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，應(yīng)用于細(xì)胞培育肉生產(chǎn)的細(xì)胞規(guī)模化培養(yǎng)技術(shù)受到廣泛關(guān)注。本研究采用3D TableTrixTM和Cytodex 1兩種微載體在轉(zhuǎn)瓶中對(duì)成肌細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，篩選出更適于成肌細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的微載體，進(jìn)而采用單因素控制變量法探討了不同培養(yǎng)條件對(duì)細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的影響。兩種微載體的顯微示意圖顯示，Cytodex 1是一種表面光滑且無大孔結(jié)構(gòu)的球體，3D TableTrixTM是一種表面多孔且孔隙較大的不規(guī)則球體。細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)結(jié)果顯示，細(xì)胞在3D TableTrixTM上生長更加高效，培養(yǎng)10 d后細(xì)胞收獲量為8.97×105 個(gè)/mL。優(yōu)化細(xì)胞在3D TableTrixTM的培養(yǎng)條件，結(jié)果顯示，在細(xì)胞貼壁期，以40 r/min速率攪拌10 min、靜置50 min的間隔攪拌方式培養(yǎng)最佳；在細(xì)胞接種密度1×105 個(gè)/mL、微載體質(zhì)量濃度2 mg/mL、攪拌速率40 r/min的條件下，初始培養(yǎng)血清體積分?jǐn)?shù)為20%，培養(yǎng)24 h后更換為血清體積分?jǐn)?shù)10%的培養(yǎng)基，并采用隔天更換50%培養(yǎng)基的補(bǔ)料方式，可獲得最佳的細(xì)胞培養(yǎng)效率。通過微載體的珠對(duì)珠轉(zhuǎn)移，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至2 L轉(zhuǎn)瓶，最終收獲細(xì)胞數(shù)量1.07×109 個(gè)，存活率達(dá)到95%以上。帶有細(xì)胞的微載體還可以凍存和復(fù)蘇，并且和解凍細(xì)胞的增殖狀況和形態(tài)沒有顯著差異。優(yōu)化后的培養(yǎng)工藝實(shí)現(xiàn)了在轉(zhuǎn)瓶中成肌細(xì)胞高效的大規(guī)模培養(yǎng)，并在工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)細(xì)胞培育肉領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。
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