領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
將麥芽糖結(jié)合蛋白（maltose-binding protein，MBP）、霍亂毒素B亞基（cholera toxin B subunit，CTB）以及增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）基因重組構(gòu)建MBP-CTB-EGFP并原核表達(dá)純化，利用HEK293T細(xì)胞模型探究MBP-CTB-EGFP穿透細(xì)胞膜的能力，從而開(kāi)發(fā)新型黏膜佐劑。進(jìn)一步地，利用原肌球蛋白（tropomyosin，TM）重組融合蛋白MBP-CTB-TM，將其應(yīng)用于Balb/c小鼠致敏實(shí)驗(yàn)，探究融合蛋白的致敏性及其對(duì)小鼠食物過(guò)敏相關(guān)免疫反應(yīng)的影響，以達(dá)到降低過(guò)敏原劑量提高建模效率的效果。結(jié)果表明：MBP-CTB-EGFP具有作為黏膜佐劑的能力，從而促進(jìn)外源蛋白進(jìn)入HEK293T細(xì)胞內(nèi)，且與轉(zhuǎn)染方式相比，攜帶外源蛋白進(jìn)入細(xì)胞的效率更高。另一方面，利用融合蛋白MBP-CTB-TM免疫小鼠，TM特異性IgE的OD450?nm達(dá)到0.4，而天然TM致敏組僅為0.05，此外融合蛋白致敏還導(dǎo)致高水平的TM特異性IgG1、IgG2a產(chǎn)生。本研究表明，融合蛋白MBP-CTB-TM致敏效果更好，有可能達(dá)到降低過(guò)敏原用量的效果，為后續(xù)食物過(guò)敏研究提供了有力工具。
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