領(lǐng)學術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
根據(jù)產(chǎn)氣莢膜梭菌（Clostridium perfringens）高度保守的plc基因，設(shè)計特異性引物和探針，建立產(chǎn)氣莢膜梭菌的實時熒光聚合酶鏈式反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）和實時熒光聚合酶重組酶擴增（recombinase polymerase amplification，RPA）檢測方法。特異性分析結(jié)果表明，建立的兩種檢測方法特異性強，僅對產(chǎn)氣莢膜梭菌有特異性擴增，對其他細菌均無擴增；兩種方法的檢出限均為1.3 pg/μL。在人工污染模擬樣品的檢測中，兩種方法的檢出限均為1.0×102 CFU/mL；實時熒光RPA需要3～13 min即可實現(xiàn)對所有陽性樣品的檢測，而實時熒光PCR則需要24～46 min（Ct值為17.45～33.65）。實時熒光RPA方法在檢測時間、操作方便性和儀器便攜性方面，明顯優(yōu)于實時熒光PCR方法。本研究建立的實時熒光PCR和實時熒光RPA檢測方法特異性強、靈敏性高、操作方便，為實驗設(shè)備裝備較差的基層檢測實驗室和疫情突發(fā)現(xiàn)場產(chǎn)氣莢膜梭菌的快速檢測提供有效技術(shù)手段。
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