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—— 中國食品雜志社
研究Pseudothermotoga thermarum木聚糖酶Pthxyn的高效表達及在啤酒釀造中的應(yīng)用。通過構(gòu)建、擴增重組質(zhì)粒pET-20b（＋）-pthxyn并在大腸桿菌中進行表達和純化，重組木聚糖酶分子質(zhì)量為130 kDa，最適pH值與最適反應(yīng)溫度分別為5.5和95 ℃。重組木聚糖酶在pH 5.0～8.0的情況下保溫2 h仍能保持80%的酶活力，在75 ℃保溫1 h仍保持83%活力。在啤酒釀造的糖化階段，于65 ℃時將重組木聚糖酶分別加入以大麥、小麥為原料的反應(yīng)體系中，采用高效液相色譜檢測木糖與葡萄糖的產(chǎn)物。以不加重組木聚糖酶為對照，結(jié)果表明，以大麥作為反應(yīng)體系原料時，木糖質(zhì)量濃度由0.017 g/L升至1.25 g/L，葡萄糖質(zhì)量濃度由20 g/L增至36.57 g/L；以小麥作為反應(yīng)體系原料時，木糖質(zhì)量濃度由0.003 g/L上升到0.708 g/L，葡萄糖質(zhì)量濃度由21.9 g/L增加到36.63 g/L。結(jié)論：本研究獲得的重組木聚糖酶具有pH值耐受性廣和良好的熱穩(wěn)定性等特點，同時在啤酒糖化階段與內(nèi)源性酶產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)使其具備較高的催化效率，因此在啤酒釀造中具有很好的應(yīng)用前景。
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