領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
以Streptomyces septatus TCCC 21057基因組為模板，擴(kuò)增得到磷脂酶D（phospholipase D，PLD）基因（pld），經(jīng)合成獲得pld密碼子優(yōu)化基因（pldm），以pPIC9K為表達(dá)載體，畢赤酵母（Pichia pastoris）GS115為宿主菌株，構(gòu)建獲得畢赤酵母重組菌株GS115/pPIC9K-pldm，搖瓶發(fā)酵后獲得的重組PLD（rPLDM）轉(zhuǎn)酯活力達(dá)2.37 U/mL；rPLDM經(jīng)純化后進(jìn)行轉(zhuǎn)酯酶學(xué)性質(zhì)分析，其最適作用溫度為60 ℃，最適作用pH值為6.5；在單水相反應(yīng)體系中，40 ℃、pH 6.5、Ca2＋濃度10 mmol/L、大豆磷脂酰膽堿和L-絲氨酸物質(zhì)的量比1∶10、rPLDM添加4.0 U/mL，反應(yīng)6 h后，磷脂酰絲氨酸（phosphatidylserine，PS）的產(chǎn)率可達(dá)到33%。本研究通過(guò)對(duì)rPLDM的重組表達(dá)、轉(zhuǎn)酯酶學(xué)性質(zhì)及催化合成PS的研究，為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)酶法合成新資源食品PS奠定了基礎(chǔ)。
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