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—— 中國食品雜志社
靈芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide，GLP）是靈芝（Ganoderma lucidum）的重要活性物質(zhì)之一，擁有優(yōu)異的保健功效，具有較高的研究價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)以菌種G055的GLP為研究對象，對其進(jìn)行提取純化并探究其對人皮膚成纖維細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的防護(hù)機(jī)制。通過Sevag法脫蛋白，采用DEAE-52離子交換層析得到GLP I和GLP II兩組分，通過正交試驗(yàn)確定GLP的提取純化工藝，GLP的最優(yōu)提取條件為料液比1∶35（m/V）、浸提溫度65 ℃、浸提時(shí)間1.5 h，在該條件下進(jìn)行驗(yàn)證，GLP提取率為（47.70±0.50）%，再現(xiàn)性良好；通過建立以H2O2誘導(dǎo)的人皮膚成纖維細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型，圍繞細(xì)胞抗氧化酶體系以及Kelch-like ECH-associated protein-1（Keap1）-核因子-E2相關(guān)因子（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2）/antioxidant response element（ARE）信號(hào)通路，探究GLP及其組分（GLP I和GLP II）在防護(hù)損傷方面的作用效果及機(jī)制。損傷前的保護(hù)處理和損傷后的修復(fù)處理下，GLP及其兩組分均能夠顯著提高細(xì)胞的超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶水平（P＜0.05），降低活性氧以及脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛的水平；GLP激活了Keap1-Nrf2/ARE信號(hào)通路的關(guān)鍵調(diào)控因子Nrf2，抑制了負(fù)調(diào)控因子Keap1，進(jìn)而促進(jìn)了下游抗氧化酶基因（NQO1和HO-1）的表達(dá)。綜上，GLP的防護(hù)作用與其抗氧化酶水平及Keap1-Nrf2/ARE信號(hào)通路密切相關(guān)。
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