目的:研究苯乳酸和醋酸聯用對單核細胞增生李斯特菌的協同抑菌活性及對細胞膜、DNA損傷的機理。方法:通過二倍稀釋法考察苯乳酸和醋酸對單核細胞增生李斯特菌的最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)和部分抑菌濃度指數;采用平板菌落計數法繪制時間-殺菌曲線;從Zeta電位、膜電勢、細胞膜完整性、細胞超微結構、DNA等方面考察苯乳酸和醋酸對單核細胞增生李斯特菌的抑菌機制。結果:苯乳酸和醋酸對單核細胞增生李斯特菌的MIC分別為2.25、1.75 mg/mL,苯乳酸與醋酸組合的部分抑菌濃度指數為0.5,表明苯乳酸與醋酸對單核細胞增生李斯特菌的抑制具有協同效應;Zeta電位結果顯示苯乳酸與醋酸有效改變了細胞表面電荷;通過DiSC3(5)熒光探針標記考察膜電勢的變化,表明苯乳酸與醋酸能消散膜電勢;流式細胞儀和熒光顯微鏡分析得出苯乳酸與醋酸破壞細胞膜完整性;經MIC苯乳酸、MIC醋酸及1/4 MIC苯乳酸+1/2 MIC醋酸作用后,單核細胞增生李斯特菌菌體變形、出現黏連、內容物泄出;瓊脂糖凝膠電泳結果表明苯乳酸和醋酸可損傷DNA。結論:苯乳酸和醋酸聯用可使細胞表面電荷減少,細胞膜電勢消散,破壞細胞膜完整性,從而進入細胞與DNA發(fā)生相互作用使細胞死亡,進而發(fā)揮協同抑菌作用。本研究為苯乳酸用于食品保鮮防腐提供了理論參考。
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