領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
為探究不同共價修飾位點對β-乳球蛋白（β-lactoglobulin，β-LG）抗原性影響，采用聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）定點修飾技術(shù)對β-LG第121位半胱氨酸（Cys121）游離巰基進(jìn)行修飾。通過單因素試驗優(yōu)化，得到最佳修飾條件：β-LG與mPEG-MAL物質(zhì)的量比1∶30，在0.1 mol/L，pH 7.0的磷酸鈉緩沖液（含3 倍物質(zhì)的量的TCEP，25%乙醇及2 mmol/L EDTA）中4 ℃反應(yīng)24 h。使用優(yōu)化條件制備產(chǎn)物修飾率達(dá)64.1%，分離純化后產(chǎn)物純度達(dá)94%。游離巰基含量測定結(jié)果顯示修飾后β-LG游離巰基含量由52.3 μmol/g降為0.3 μmol/g。經(jīng)驗證mPEG-MAL與β-LG Cys121游離巰基發(fā)生特異性結(jié)合。經(jīng)巰基定點修飾后，β-LG-MAL較天然β-LG抗原性顯著提升25.9%，巰基修飾與前期不同位點修飾抗原性結(jié)果相反，定點修飾能有效探究不同位點共價修飾對蛋白抗原性的影響。
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