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PCR方法檢測(cè)食品中的轉(zhuǎn)基因成分35S和NOS的研究
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 174 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 劉光明, 蘇文金, 欒國(guó)彥, 宋思揚(yáng), 梁基選
關(guān)鍵詞: 轉(zhuǎn)基因|PCR|熒光PCR|熒光雙鏈探針|
摘要:

根據(jù)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物中最常用的花椰菜葉病毒啟動(dòng)子(CaMV35S)和根癌農(nóng)桿菌終止子(NOS)的序列,設(shè)計(jì)并合成了兩對(duì)不同的引物和相對(duì)應(yīng)的兩種熒光雙鏈探針(FDCP),分別建立了常規(guī)PCR、應(yīng)用FDCP的新型實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)基因成分35S啟動(dòng)子和NOS終止子的方法。利用該套方法對(duì)冷凍馬鈴薯?xiàng)l、大豆、冷凍玉米棒、甜椒、番茄等實(shí)物樣品進(jìn)行了檢測(cè),發(fā)現(xiàn)11份樣品中有5份檢出35S啟動(dòng)子、NOS終止子,6份樣品結(jié)果為陰性。結(jié)果表明我們建立的兩種PCR方法均能有效檢測(cè)出35S和NOS片段,其中常規(guī)PCR方法具有靈敏度高、特異性好的特點(diǎn);應(yīng)用FDCP的新型實(shí)時(shí)熒光PCR方法則更為簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確,有很好的應(yīng)用前景和研究?jī)r(jià)值。

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