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番茄、甜椒中轉基因成分和內源基因的多重PCR檢測方法的建立
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 151 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 邵碧英, 江樹勛, 陳文炳, 李壽崧
關鍵詞: 番茄|甜椒|轉基因成分|多重PCR|
摘要:

采用SDS法提取番茄未成熟及成熟果實和甜椒成熟果實中的總DNA,內源rbcL基因擴增結果均為陽性,表明已提取到DNA及DNA中不存在抑制PCR的物質。應用花椰菜花葉病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)35S啟動子、根癌農(nóng)桿菌胭脂堿合成酶基因(nos)終止子和大腸桿菌K12菌株新霉素磷酸轉移酶Ⅱ(nptⅡ)基因的三重PCR檢測樣品DNA中的轉基因成分,結果均為陰性。將番茄、甜椒的DNA和陽性質粒pBI121進行混和,作為PCR反應的DNA模板,成功建立了可同時檢測內源rbcL基因、nptⅡ基因、CaMV35S啟動子和nos終止子的多重PCR方法。多重PCR方法具有快速、簡便、準確等特點,在轉基因產(chǎn)品檢測上具有重要的應用價值。

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