領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
制備全長和截短的弧菌外膜蛋白K（outer membrane protein K，OMPK），純化后的OMPK免疫6～8 周雌性BALB/c小鼠，間接夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法檢測小鼠的血清效價(jià)，結(jié)果表明全長OMPK重組蛋白制備的血清效價(jià)是截短OMPK1重組蛋白制備血清效價(jià)的128?倍。通過全長的OMPK重組蛋白制備多株用于檢測副溶血弧菌的單克隆抗體，用生物素（biotin）和辣根過氧化物酶對單克隆抗體進(jìn)行標(biāo)記。間接夾心ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：只有VP3-biotin和VP16-biotin與其他單克隆抗體配對檢測不同的副溶血弧菌菌株表現(xiàn)出較高的靈敏度及良好的特異性，并且在檢測其他種屬20?株菌時(shí)無交叉反應(yīng)。VP16(Fab)-biotin/VP3檢測副溶血弧菌時(shí)較VP16-biotin/VP3具有更高的靈敏度，該方法用于檢測海鮮樣品時(shí)，VP16-biotin/VP3檢測三文魚（5～10?CFU/25?g）和血蚶樣品為副溶血弧菌陽性。本研究開發(fā)了一種快速、靈敏、簡便的副溶血弧菌間接夾心ELISA檢測方法。
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