領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的:克隆大腸桿菌錳超氧化物歧化酶基因(sodA)并在保加利亞乳桿菌(L6032)中表達(dá),以提高該菌對氧的耐受性,同時(shí)為SOD發(fā)酵奶的研制奠定實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。方法:PCR擴(kuò)增大腸桿菌sodA,將其克隆入乳酸菌表達(dá)載體pMG36e中,并將該重組質(zhì)粒pMG36e-sod電轉(zhuǎn)入L6032中表達(dá)。用SOD測試盒測定SOD的表達(dá)活性,同時(shí)對L6032及其重組子在MRS平板上的生長情況及其在有氧條件下的存活情況進(jìn)行比較,初步探討SOD在L6032中的活性表達(dá)對其氧耐受性的影響。結(jié)果:構(gòu)建了重組質(zhì)粒pMG36e-sod,經(jīng)酶切和PCR鑒定與預(yù)期完全吻合。核酸測序顯示插入的sodA片段能正確編碼SOD氨基酸序列。利用電轉(zhuǎn)化成功地將重組質(zhì)粒導(dǎo)入L6032中,SOD的表達(dá)活性約590.5NU/mgprot。SOD的活性表達(dá),能增強(qiáng)保加利亞乳桿菌對氧的耐受性,在有氧條件下重組子的生長和存活率都優(yōu)于原菌。結(jié)論:SodA在保加利亞乳桿菌中獲得了成功表達(dá),增強(qiáng)了該菌對氧的耐受性,有利于該菌的開發(fā)應(yīng)用。同時(shí)也為下一步SOD發(fā)酵奶的研制奠定了實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。
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