領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
本文探討了利用了(NH4)2SO4分級(jí)沉淀、透析脫鹽及Q-SepharoseFF層析分離純化酪蛋白的胃蛋白酶水解物中的CGMP的工藝。結(jié)果表明:采用60%飽和度的(NH4)2SO4鹽析,可從上清液中直接回收高純度CGMP,得率為0.71%。低飽和度的(NH4)2SO4可有效脫除雜蛋白。脫鹽粗提物CGMPQ-SepharoseFF層析條件為:pH8.5、20mmol/LTris緩沖液平衡上樣,用含0.3mol/LNaCl、20mmol、pH7.1的Tris緩沖液洗脫;濃縮物最大上樣量為34.2mg蛋白/ml樹脂。利用優(yōu)化的工藝對(duì)水解液層析純化,純化產(chǎn)物得率約為2.19%(以酪蛋白計(jì)),總結(jié)合態(tài)唾液酸回收率為87.4%(以酶解液中的唾液酸計(jì)),糖基化度可提高到0.472以上。整個(gè)工藝路線簡(jiǎn)便、快捷、成本較低,適合工業(yè)化生產(chǎn)。
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