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—— 中國食品雜志社
本研究采用硫酸銨沉淀結(jié)合DEAE-SepharoseFF離子交換柱層析技術(shù)分離純化紫球藻中的B-藻紅蛋白。試驗結(jié)果表明,藻紅蛋白粗提物經(jīng)65%硫酸銨沉淀2d后過柱層析,B-藻紅蛋白的純度為A545nm/A280nm=3.0;而用65%硫酸銨沉淀2個月后,只需采用一步柱層析,B-藻紅蛋白的純度可提高到5.37,即達到純品要求(純度大于4.5)。說明65%硫酸銨對B-藻紅蛋白具有高度選擇性,其工藝效果對分離純化有很大影響。特征吸收光譜和熒光光譜證實純化后的產(chǎn)物符合B-藻紅蛋白的性質(zhì),Native-PAGE電泳只出現(xiàn)單一染色帶,表明獲得的B-藻紅蛋白是均一的;SDS-PAGE電泳出現(xiàn)2條染色帶,一條著色較深帶為α和β亞基,分子量為16～18kD左右,另一條較淺為γ亞基,分子量大約為31kD。同時建立了涂層毛細管柱結(jié)合激光誘導熒光電泳技術(shù)快速檢測B-藻紅蛋白純度的分析方法,結(jié)果出現(xiàn)單一峰,表明毛細管電泳用于B-藻紅蛋白的純度檢測高效可靠。
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