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轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中常見(jiàn)外源基因的克隆與轉(zhuǎn)化
來(lái)源：食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 124 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 邵碧英, 陳文炳, 楊婕, 江樹(shù)勛, 李壽崧
關(guān)鍵詞: 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品； 外源基因； 克隆； 轉(zhuǎn)化；
摘要:

設(shè)計(jì)帶不同酶切位點(diǎn)的引物,分別用PCR擴(kuò)增植物內(nèi)源rbcL基因和2種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中常見(jiàn)的外源基因-CP4-EPSPS基因和BAR基因,并分別與pGEM-TEasyVector連接,克隆到大腸桿菌DH5α中。提取克隆菌落的質(zhì)粒,并進(jìn)行酶切鑒定和序列測(cè)定。對(duì)3個(gè)基因的克隆質(zhì)粒進(jìn)行相應(yīng)的雙酶切,回收酶切產(chǎn)物,先后轉(zhuǎn)化到受體載體pCAMBW中。最后獲得的重組質(zhì)粒的酶切和PCR鑒定結(jié)果表明3個(gè)基因已被成功轉(zhuǎn)化到受體載體中。

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