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丁草胺人工抗原及抗體制備研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 122 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 雷紅濤, 肖治理, 方堅(jiān)生, 沈玉棟, 劉文字, 孫遠(yuǎn)明, 馮偉雯
關(guān)鍵詞: 丁草胺; 人工抗原; 抗血清;
摘要:

以除草劑丁草胺、巰基丙酸為原料,合成丁草胺半抗原,用氫核磁共振、電噴霧質(zhì)譜、紅外光譜方法進(jìn)行鑒定;通過活潑酯法將半抗原與載體蛋白偶聯(lián)制備丁草胺人工抗原,用紫外光譜法對(duì)其鑒定;免疫動(dòng)物后,間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)鑒定抗體。結(jié)果表明,巰基丙酸與丁草胺連接生成半抗原,半抗原被連接到載體蛋白上,丁草胺人工抗原合成成功,獲得了丁草胺小鼠抗血清。棋盤滴定法確定包被抗原工作濃度為3μg/ml,抗血清稀釋倍數(shù)為32000倍。建立了間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線,丁草胺IC50為1.44μg/ml,檢測(cè)限為0.47μg/ml。

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