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—— 中國食品雜志社
本研究以堿性絲氨酸蛋白酶和蛋白酶Ⅱ作為水解酶對大豆分離蛋白進(jìn)行兩步定向酶切,以制備具有改善肝昏迷生物活性的高F值寡肽。本研究設(shè)定兩種定向酶切的技術(shù)路線,即在酶解過程中維持堿性絲氨酸蛋白酶最適pH的時(shí)間分別設(shè)定為3h(技術(shù)路線Ⅰ)和30min(技術(shù)路線Ⅱ),而蛋白酶Ⅱ分別在酸性及中性條件下繼續(xù)酶解大豆分離蛋白水解液。結(jié)果表明,技術(shù)路線Ⅰ、Ⅱ蛋白質(zhì)回收率分別為86.5%、87.8%;酸溶性氮得率分別為83.2%、86.4%;灰分含量分別為11.1%、7.0%;技術(shù)路線Ⅰ所得肽的相對分子質(zhì)量分布范圍為:分子量大于5000的肽占肽總量的20.6%,分子量在3000左右的肽占總量的3.3%,分子量在500～600之間的肽占肽總量的61.3%;技術(shù)路線Ⅱ所得的產(chǎn)物組分相對分子質(zhì)量分布范圍為:分子量在1000以下的占71.3%,且分子量主要在700～900之間,分子量在2000左右的占5.7%,分子量在5000以上的占12.8%。研究結(jié)果表明,技術(shù)路線Ⅱ的酶切效果優(yōu)于技術(shù)路線Ⅰ的。
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