領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
將克隆了噬夏孢歐文氏菌類(lèi)胡蘿卜素合成相關(guān)基因crtE、crtB、crtI的重組質(zhì)粒pET-15bcrtEIB和crtY的重組質(zhì)粒pACYC-184crtY共轉(zhuǎn)化E.coliBL21(DE3)構(gòu)建工程菌。研究了碳源、氮源、金屬離子、培養(yǎng)溫度、光照、pH值、誘導(dǎo)時(shí)間等參數(shù)對(duì)工程菌生長(zhǎng)及色素累積的影響,確定了合適的培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基為改良LB培養(yǎng)基(蛋白胨10g/L、酵母提取物10g/L、可溶性淀粉5g/L、MgCl20.04g/L、FeCl30.01g/L、NaCl10g/L,pH5.8),光照,起始培養(yǎng)溫度為37℃,培養(yǎng)至OD600為0.6時(shí)加入IPTG至終濃度為0.5mmol/L,誘導(dǎo)溫度降至28℃;誘導(dǎo)時(shí)間為12h。發(fā)酵完成后工程菌的生物量為7.32gdw/L,β-胡蘿卜素的最高含量可達(dá)5.11mg/gdw。
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