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酪蛋白和乳球蛋白的抗體及酶標物制備研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 144 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 宋宏新, 柏紅梅, 薛海燕, 馬冬, 劉靜
關(guān)鍵詞: β-酪蛋白(β-CN); β-乳球蛋白(β-Lg); 雞卵黃抗體(IgY); 抗原酶標; 酶聯(lián)免疫吸附;
摘要:

選用牛乳中的β-酪蛋白(β-CN)和β-乳球蛋白(β-Lg)為抗原對雞體免疫,從雞卵黃中用水稀釋法及親和色譜(HiTrapTM IgY Purification HP)純化特異性雞卵黃抗體(IgY)。PAGE電泳分析IgY純度高達90%,ELISA效價為1:4096。用過碘酸鈉氧化法進行抗原的過氧化物酶(HRP)標記,HRP與β-CN和β-Lg的分子個數(shù)比分別為1:1和1.5:1的標記效果最好,β-CN-HRP和β-Lg-HRP的效價高達1:640,其ELISA工作濃度分別為1:80和1:40。特異性IgY和酶標抗原為特異檢測牛乳蛋白的酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)分析提供必要條件。

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