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磺胺嘧啶單克隆抗體的制備與鑒定
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 116 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 王劉花,許 楊* ,郭杰標(biāo),張 泓,何慶華
關(guān)鍵詞: 磺胺嘧啶|重氮法|酶聯(lián)免疫檢測(cè)|單克隆抗體
摘要:

采用重氮法同時(shí)制備結(jié)合比分別為9.0、8.0、3.7 的3 種磺胺嘧啶免疫抗原,并將其免疫BALB/c 小鼠,其中結(jié)合比為8.0 的一組免疫效果最佳。獲得一株穩(wěn)定分泌抗磺胺嘧啶單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞(1F6),體內(nèi)誘生法制備腹水。間接ELISA 測(cè)定腹水效價(jià)為1:1.28 × 106,建立間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),其檢測(cè)下限為10.4ng/mL,線(xiàn)性范圍為14.8~421.5ng/mL,IC50 值為79.1ng/mL,與磺胺二甲嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺對(duì)甲氧嘧啶交叉反應(yīng)率分別為 0.3%、0.99%、4.5%,與磺胺甲噁唑、磺胺喹惡啉、對(duì)氨基苯甲酸、磺胺、對(duì)氨基苯磺酸未見(jiàn)有交叉反應(yīng)。經(jīng)鑒定,單克隆抗體免疫球蛋白為鼠IgG 的2b 亞類(lèi)。

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