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環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法快速檢測(cè)阪崎腸桿菌
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 113 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 馬寅眾,陳江源,房國(guó)梁,李 琦,李 睿,周幗萍,劉志國(guó)
關(guān)鍵詞: 阪崎腸桿菌|環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增|快速檢測(cè)
摘要:

目的:研究阪崎腸桿菌的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(loop-mediated isothermal amplification,簡(jiǎn)稱LAMP)方法,實(shí)現(xiàn)對(duì)食品中阪崎腸桿菌的快速檢測(cè)。方法:針對(duì)阪崎腸桿菌16S rRNA 基因(16S rDNA)及外膜蛋白A(OmpA)基因設(shè)計(jì)LAMP 引物,擴(kuò)增后通過(guò)電泳或加入顯色劑SYBR-GREEN Ⅰ檢測(cè)。結(jié)果:LAMP 法能有效特異地檢測(cè)出阪崎腸桿菌;以16S rRNA 引物檢測(cè)阪崎腸桿菌的最低檢出限為32CFU/mL,用OmpA 引物檢測(cè)阪崎腸桿菌的最低檢出限達(dá)3CFU/mL,擴(kuò)增產(chǎn)物加入SYBR-GREEN Ⅰ在紫外條件下可見熒光,與電泳檢測(cè)具有同樣的靈敏度。結(jié)論:LAMP 法可實(shí)現(xiàn)對(duì)阪崎腸桿菌的快速檢測(cè),在食品檢測(cè)中具有廣闊的應(yīng)用前景。

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