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標(biāo)準(zhǔn)分子構(gòu)建及其在轉(zhuǎn)基因玉米59122定量檢測中的應(yīng)用
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 128 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: LU Jiao,YANG Rong,HUANG Kun-lun,ZHAO Wei-wei,LUO Yun-bo,YUAN Yan-fang,XU Wen-tao
關(guān)鍵詞: 品系特異性;實時熒光PCR;轉(zhuǎn)基因玉米;標(biāo)準(zhǔn)分子
摘要:

根據(jù)轉(zhuǎn)基因作物59122 的外源基因與玉米基因組之間的左側(cè)側(cè)翼序列設(shè)計具品系特異性的熒光探針及引物,以實時熒光PCR 技術(shù)建立59122 的品系特定量檢測方法,以重組PCR 技術(shù)成功獲得了標(biāo)準(zhǔn)分子(整合了內(nèi)標(biāo)基因序列與左側(cè)翼序列)梯度范圍為101~105,定量范圍為0.01%~100%;建立了玉米內(nèi)源基因與側(cè)翼序列的標(biāo)準(zhǔn)曲線,變異系數(shù)CV 值、標(biāo)準(zhǔn)偏差SD 以及相關(guān)系數(shù)R2 均可接受;檢測5 個已知轉(zhuǎn)基因含量(0.1%、0.5%、1%、2%、5%)的混合樣品中的轉(zhuǎn)基因含量,結(jié)果分別為0.12%、0.56%、1.04%、1.61%、4.66%,實驗誤差小于25%,結(jié)果可信。

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