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食品中四環(huán)素類殘留的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒的研制
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 185 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 國(guó)占寶,武玉香,田文禮,趙亞周,彭文君 ,柳家鵬
關(guān)鍵詞: 食品|四環(huán)素|單克隆抗體|競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫
摘要:

目的:基于定量檢測(cè)動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類抗生素的殘留量,開發(fā)研制四環(huán)素類抗生素競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫(ELISA)檢測(cè)試劑盒。方法:采用雜交瘤技術(shù),篩選并克隆穩(wěn)定分泌抗四環(huán)素(CEL)的雜交瘤細(xì)胞株,利用免疫BALB/c 小白鼠制備抗四環(huán)素單克隆抗體。結(jié)果:logit/log 擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線為y= - 2.3x + 2.79,相關(guān)系數(shù)r=0.9971,線性檢測(cè)范圍為0.05~4.05ng/mL,半數(shù)抑制劑量(IC50)為0.293ng/mL,靈敏度為0.05ng/mL,檢測(cè)限為3~5ng/mL;組織、牛奶、蜂蜜的添加回收率分別為(90 ± 10)%、(85 ± 10)%、(90 ± 10)%;平均批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于15%;四環(huán)素與金霉素等同類抗生素的交叉反應(yīng)率大于60%,與其他類抗生素?zé)o交叉反應(yīng);此試劑盒在4℃可保存180d 以上。結(jié)論:建立的試劑盒是符合技術(shù)指標(biāo)的要求,可用于動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類抗生素殘留的定量檢測(cè)。

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