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植物乳桿菌melA基因的克隆及其作為食品級(jí)篩選標(biāo)記的初步研究
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 158 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 任大勇,李 昌*,秦艷青,杜壽文,諸晴麗,金寧一
關(guān)鍵詞: α-半乳糖苷酶|melA|食品級(jí)篩選標(biāo)記|穿梭表達(dá)載體|乳酸乳球菌
摘要:

以L(fǎng). plantarum1.557的基因組DNA為模板,通過(guò)PCR技術(shù)成功克隆α-半乳糖苷酶基因(melA基因),與報(bào)道的melA基因序列同源性達(dá)到99%以上。再以大腸桿菌-乳酸菌穿梭表達(dá)載體pMG36e為基本骨架,將melA基因插入該載體,構(gòu)建melA基因標(biāo)記的穿梭表達(dá)載體pMG36e-melA。重組表達(dá)質(zhì)粒pMG36e-melA經(jīng)Sac I和Sph I雙酶切和PCR鑒定與預(yù)期片段大小相符。結(jié)果表明已初步構(gòu)建了以melA基因?yàn)槭称芳?jí)篩選標(biāo)記的重組載體。

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