領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先,創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
期刊集群
金黃色葡萄球菌RAA-LFD快速檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 300 發(fā)表時(shí)間: 2022-03-23
作者: 后來(lái)旺,李達(dá)容,鄧波,趙勇,潘迎捷,豐東升,孫曉紅
關(guān)鍵詞: 金黃色葡萄球菌;重組酶等溫?cái)U(kuò)增技術(shù);側(cè)流層析試紙條;快速檢測(cè)
摘要:

靶向金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)保守基因(nuc)序列設(shè)計(jì)特異性引物,經(jīng)引物篩選和反應(yīng)條件的優(yōu)化,建立金黃色葡萄球菌的重組酶等溫?cái)U(kuò)增(recombinase aided amplification,RAA)結(jié)合側(cè)流層析試紙條(lateral flow dipstick,LFD)的快速檢測(cè)方法。該方法在引物濃度200 nmol/L、33 ℃反應(yīng)20 min即可實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)基因片段的有效擴(kuò)增。特異性分析結(jié)果表明RAA-LFD方法檢測(cè)金黃色葡萄球菌與其他常見(jiàn)致病菌菌株間不存在交叉反應(yīng),靈敏度分析結(jié)果表明RAA-LFD方法檢測(cè)金黃色葡萄球菌的檢出限為4 fg/μL(DNA)與1.83×102 CFU/mL(純菌液)。用人工污染牛奶樣品驗(yàn)證RAA-LFD方法的可靠性,結(jié)果顯示在增菌6 h時(shí),RAA-LFD方法可檢測(cè)到1.83×101 CFU/mL金黃色葡萄球菌。分別采用微生物生化鑒定法、PCR法與RAA-LFD方法對(duì)64 份牛奶樣品進(jìn)行金黃色葡萄球菌檢測(cè),結(jié)果表明,RAA-LFD方法與微生物生化鑒定法總符合率為95.3%,與PCR法總符合率(98.4%)表現(xiàn)出較高的一致性。本研究建立的可視化檢測(cè)方法具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速高效、操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)結(jié)果直觀、對(duì)儀器設(shè)備要求低等特點(diǎn),為牛奶中金黃色葡萄球菌的檢測(cè)提供新的發(fā)展方向。

電話: 010-87293157 地址: 北京市豐臺(tái)區(qū)洋橋70號(hào)

版權(quán)所有 @ 2023 中國(guó)食品雜志社 京公網(wǎng)安備11010602060050號(hào) 京ICP備14033398號(hào)-2

丰台区| 双鸭山市| 荃湾区| 唐河县| 绿春县| 丰都县| 定边县| 成都市| 乌鲁木齐市| 拜城县| 浑源县| 航空| 红原县| 随州市| 金山区| 新乐市| 南川市| 莆田市| 克什克腾旗| 如皋市| 固安县| 韶关市| 新疆| 柳林县| 天祝| 当涂县| 永胜县| 新绛县| 荆州市| 崇文区| 兰考县| 儋州市| 新竹市| 鄂伦春自治旗| 鄂托克旗| 滨海县| 鄄城县| 越西县| 攀枝花市| 内江市| 泾川县|