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藻藍蛋白酶解肽的分離純化及其細胞毒活性
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 139 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 王雪青,鄧 偉,楊進芳,毛羽聰,史中明
關(guān)鍵詞: 藻藍蛋白|純化|酶解肽|細胞毒活性
摘要:

研究鈍頂螺旋藻(Spirulina platensis)藻藍蛋白(C-phycocyanin,C-PC)及其胰蛋白酶水解肽的分離純化。采用反復(fù)凍融和超聲破碎法破碎細胞,用28~55g/100mL硫酸銨沉淀反復(fù)鹽析獲得純度(A620nm/A280nm)為2.19的藻藍蛋白,再通過羥基磷灰石(HA)柱層析和Sephacryl S-200 HR凝膠層析對其進行純化,得到純度(A620nm/A280nm)為3.89藻藍蛋白。純化后的藻藍蛋白在40℃條件下經(jīng)胰蛋白酶酶解60min后,用DEAE-Sepharose Fast Flow柱層析對酶解肽產(chǎn)物進行分離,收集得到4組藻藍蛋白酶解肽。采用MTT方法,研究藻藍蛋白、酶解混合液、分離的4個酶解肽組分對腫瘤細胞系HeLa和293T增殖的影響。結(jié)果顯示:肽組分1和4對HeLa細胞的抑制率分別為37.71%和47.04%,而混合肽和藻藍蛋白抑制率分別為34.02%和26.03%,因此活性肽組分1和4顯示出較好的腫瘤抑制效果,而這兩種活性肽組分對正常細胞293T并無細胞毒活性,特別是組分4效果最明顯,是極具開發(fā)潛力的保健產(chǎn)品。

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