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葡萄糖-6-磷酸脫氫酶基因的Candida tropicalis過量表達及其對木糖醇合成代謝的影響
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 138 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 高雪楠,張 嬋,尹 勝,張秋晨,王成濤,徐寶財
關(guān)鍵詞: Candida tropicalis;葡萄糖-6-磷酸脫氫酶;g6pd基因;過量表達;木糖醇
摘要:

研究葡萄糖-6-磷酸脫氫酶基因g6pd過量表達對Candida tropicalis木糖醇生物合成代謝的影響。克隆Candidatropicalis CT16的g6pd基因,并將其與表達載體pYES-pgk重組連接,構(gòu)建重組載體pYES-pgk-g6pd,LiAc/ssDNA/PEG方法轉(zhuǎn)化導入C. tropicalis CT16,篩選陽性轉(zhuǎn)化子,實現(xiàn)g6pd基因的過量表達。結(jié)果表明:發(fā)酵62 h,陽性轉(zhuǎn)化子C. tropicalis SYG5的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活力提高了300%,發(fā)酵液中木糖醇質(zhì)量濃度達到79.90 g/L,較野生型對照菌株的木糖醇產(chǎn)量提高了12.41%,木糖醇產(chǎn)率提高了44.94%。因此,葡萄糖-6-磷酸脫氫酶在C. tropicalis木糖醇的合成代謝途徑中發(fā)揮重要作用,增強g6pd基因的表達,可以明顯提高菌體NADPH供應量和還原力,有利于木糖醇的生物合成。

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