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—— 中國食品雜志社
將牛凝乳酶原基因連接pNZ8149載體，并轉化乳酸乳球菌NZ3900，經(jīng)乳酸鏈球菌素Nisin誘導，測得重組菌株胞內(nèi)凝乳酶活力達到0.7 SU/mL，培養(yǎng)基中檢測不到凝乳酶活力，實現(xiàn)了牛凝乳酶原基因在乳酸鏈球菌Nisin誘導基因表達系統(tǒng)（nisin controlled gene expression system，NICE）中活性表達。在此基礎上，將分泌信號肽SPusp45連接于pNZ8149，構建了分泌型表達載體pNZ8149s，并實現(xiàn)牛凝乳酶原基因在NICE系統(tǒng)中分泌表達。當使用1 ng/mLNisin誘導5 h后，重組菌株胞內(nèi)檢測不到凝乳酶活力，培養(yǎng)基中凝乳酶活力為1.2 SU/mL，說明pNZ8149s能夠促使凝乳酶原從乳酸乳球菌中分泌。該方法為重組牛凝乳酶在食品級菌株中重組表達提供了一種可行的方案。
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