領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的：從苦蕎麥種子中提取、純化苦蕎凝集素，對其凝血及酶學(xué)活性等性質(zhì)進行初步研究。方法： 采用緩沖液抽提、硫酸銨沉淀、透析及DEAE-纖維素陰離子交換層析（DEAE fast flow，DEAE FF）純化凝集素；高碘酸希夫（periodic acid-Schiff，PAS）染色鑒定其蛋白種類，硫酸-苯酚法測定糖含量；凝血實驗和糖抑制實驗檢測其凝血活性和結(jié)合糖特異性；以對硝基苯磷酸二鈉為底物，測定磷酸酯酶活性。結(jié)果：從苦蕎麥種子中獲得了一種具有凝血功能的蛋白質(zhì)--苦蕎凝集素（tartary buckwheat lectin，TBL）。純化的TBL在十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）圖譜上顯示單一條帶，根據(jù)SDS-PAGE計算其分子質(zhì)量約為62 kD。PAS染色證明TBL為糖蛋白，糖含量為5.8%。凝血實驗表明TBL對人的O型血紅細(xì)胞具有特異性凝集作用，效價為15 μg/mL，對其他血型的紅細(xì)胞沒有凝血效應(yīng)。血凝活性被D-甘露糖和D-葡萄糖抑制，推測其是一種甘露糖結(jié)合凝集素。酶學(xué)性質(zhì)鑒定顯示，TBL具有磷酸酯酶活性，米氏常數(shù)Km= 9.86×10－3 mol/L。結(jié)論：TBL可能是苦蕎麥種子中的一種具有多種酶學(xué)功能的甘露糖凝集素
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