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基于蛋白A-瓊脂糖凝膠黃曲霉毒素B1免疫親和柱的制備
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 228 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 龔 燕,楊婷婷,莫曉嵩,張海濤,黃 偉,陸廷瑾,張東升,汪海峰
關(guān)鍵詞: 黃曲霉毒素B1;蛋白A-瓊脂糖凝膠;定向偶聯(lián);免疫親和柱
摘要:

將初步純化的抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體,定向偶聯(lián)于蛋白A-瓊脂糖凝膠,制備成免疫親和層析柱。結(jié)果顯示,辛酸-飽和硫酸銨純化后的單抗質(zhì)量濃度為17.5 mg/mL,純度為45.1%,抗體亞型為IgG1。取純化后抗體48 μL與1 mL蛋白A凝膠偶聯(lián),偶聯(lián)率達(dá)98.1%,高效液相色譜測(cè)定其平均相對(duì)柱容量為105 ng/0.125 mL凝膠、柱空白為0,不同樣品(玉米粉、面粉、花生油、醬油、醋等)平均加標(biāo)回收率在80%以上。該親和柱在2~8 ℃保存12 個(gè)月后,相對(duì)柱容量仍可達(dá)72 ng/0.125 mL凝膠。該法制備的親和柱相對(duì)柱容量大,穩(wěn)定性好,可用于樣品中黃曲霉毒素B1分離凈化的要求。

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