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—— 中國食品雜志社
從黑豆種子中分離純化1 種黑豆脂氧合酶--bsLOX，對其酶學活性及降解花色苷等性質(zhì)進行初步研究。采用緩沖液抽提、硫酸銨沉淀、透析、陽離子交換層析及凝膠層析等方法純化出具有β-葡萄糖苷酶活性的bsLOX；分別以亞油酸鈉和對硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷（p-nitrophenyl β-D-glucopyranoside，pNPG）為反應底物鑒定bsLOX的脂氧合酶活性和β-葡萄糖苷酶活性。從黑豆種子中純化獲得的bsLOX在十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis，SDS-PAGE）圖譜顯示單一條帶，分子質(zhì)量約為95 kD。酶活性分析表明，純化的bsLOX以亞油酸鈉為底物時，酶活力為13 U/mL；當以pNPG為底物在405 nm波長處檢測到了對硝基苯酚的生成，從而推測bsLOX具有β-葡萄糖苷酶活性。高效液相色譜實驗結(jié)果表明bsLOX可以降解花色苷（矢車菊素-3-O-葡萄糖苷、矮牽牛素-3-O-葡萄糖苷）為花色素（矢車菊素、矮牽牛素）。由于降解作用不完全，繼而發(fā)現(xiàn)花色素能抑制bsLOX的酶活性。bsLOX是黑豆中的一種兼具β-葡萄糖苷酶功能的蛋白質(zhì)，而花色素可能是天然的bsLOX抑制劑。
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