領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
為證明黏質(zhì)沙雷氏菌磷脂酶A1輔助蛋白PlaS在大腸桿菌BL21（DE3）異源表達中對細胞膜有明顯的破壞作用，探究了細胞膜特性的變化，并采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)鑒定了其對細胞膜脂肪酸的影響，通過激光共聚焦顯微鏡驗證了亞細胞水平定位。結(jié)果顯示：PlaS異源表達后，宿主菌內(nèi)外膜通透性明顯提高、細胞膜流動性與表面疏水性嚴重下降，表明細胞膜功能已經(jīng)喪失；脂肪酸飽和程度下降，即直鏈飽和脂肪酸和反式單不飽和脂肪酸相對含量降低，以及順式單不飽和脂肪酸相對含量增加、膜剛性增強、流動性減少，細胞膜組分與結(jié)構(gòu)表現(xiàn)異常導(dǎo)致細胞易死亡。激光共聚焦顯微鏡顯示，在宿主細胞膜上發(fā)現(xiàn)明顯熒光。綜上所述，PlaS屬于膜蛋白，在大腸桿菌異源表達中會破壞宿主菌細胞膜的結(jié)構(gòu)與功能，表現(xiàn)生長抑制現(xiàn)象，這將為進一步PlaS抑制機理的研究與其功能開發(fā)提供一定支持。
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