領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的：建立更加靈敏、特異的食品鎘離子膠體金免疫層析快速檢測方法。方法：用1-（4-異硫氰芐基）乙烯基二胺-N,N,N’,N’-四乙酸（1-(4-isothiocyanobenzyl)ethylenediamine-N,N,N’,N’-tetraacetic acid，iEDTA）鰲合鎘離子合成Cd2＋-iEDTA半抗原，異硫氰酯法制備免疫原Cd2＋-iEDTA-牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）和包被原Cd2＋-iEDTA-雞卵清蛋白（ovalbumin，OVA），電感耦合等離子體發(fā)射光譜法和聚丙烯酰胺凝膠法進(jìn)行鑒定；用Cd2＋-iEDTA-BSA免疫Balb/C小鼠，細(xì)胞融合技術(shù)篩選Cd2＋-EDTA單克隆抗體（mAb）雜交瘤細(xì)胞株，體內(nèi)誘生腹水法制備Cd2＋-EDTA mAb；應(yīng)用Cd2＋-EDTA mAb建立Cd2＋殘留膠體金免疫層析快速檢測方法（Cd2＋-Strip），并測定其性能。結(jié)果：免疫原偶聯(lián)成功，Cd2＋-iEDTA-BSA中BSA與Cd2＋的含量分別為7.1 mg/mL和191.7 μg/mL；篩選出1A3C11、2B7D8、2E10G9、4F3E7共4 株雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)9 次傳代分泌抗體穩(wěn)定，親和力最高的2E10G9株親和常數(shù)（Ka）為7.58×108 L/mol，對Cd2＋-iEDTA的半數(shù)抑制濃度為16.3 μg/L，與Hg2＋-EDTA的交叉反應(yīng)（cross-reaction，CR）率為18.6%，與其他重金屬離子無CR；Cd2＋-Strip的檢測時(shí)間為10 min，檢出限為5 μg/L，其檢測結(jié)果與競爭ELISA試劑盒（Cd2＋ ELISA-Kit）、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法符合率為100%。結(jié)論：制備出了親和力高、特異性強(qiáng)的Cd2＋ mAb，建立了靈敏、特異、快速、簡便的食品鎘離子膠體金免疫層析快速檢測方法。
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