領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
根據(jù)雙歧桿菌屬16S rRNA基因的保守區(qū)序設(shè)計特異性引物和探針，建立一種鑒定食品中雙歧桿菌屬的實時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）檢測方法。對方法的特異性、靈敏度、重復(fù)性和體系抗干擾能力進行驗證，最后采用該方法對市售25 份標(biāo)示含雙歧桿菌樣品進行檢測。結(jié)果表明：該檢測方法可特異性檢測雙歧桿菌屬細(xì)菌，對近緣的乳桿菌屬、鏈球菌屬及食品中常見菌群包括大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌等均無擴增。雙歧桿菌DNA檢測絕對靈敏度可達(dá)到2 pg，相對靈敏度可達(dá)到104 CFU/mL。重復(fù)性測試表明相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于1%。同時進行了雜菌干擾檢測實驗，在培養(yǎng)物水平和純基因組DNA水平上將青春雙歧桿菌ATCC15703與大腸桿菌ATCC25922混合進行檢測，檢出Ct值較純菌檢測時無顯著影響，表明建立的熒光PCR方法抗干擾能力良好。對25 份市售實際樣品進行測試，有5 份標(biāo)識含有“雙歧桿菌”的樣品未檢測出雙歧桿菌成分。本研究所建立的實時熒光PCR法能準(zhǔn)確、快速檢測食品中雙歧桿菌屬細(xì)菌。
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