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基于疊氮溴化丙錠與恒溫核酸擴(kuò)增技術(shù)快速檢測亞致死狀態(tài)食源金黃色葡萄球菌
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 175 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 曹 瀟,趙力超,楊翠琪,谷立慧,歐陽廣宇,陳 金,陳思鍇,譚綺雯,王 麗
關(guān)鍵詞: 食品安全|金黃色葡萄球菌|亞致死狀態(tài)|疊氮溴化丙錠-環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)|快速檢測
摘要:

建立一種將熒光染料疊氮溴化丙錠(propidium monoazide,PMA)與環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(loop-mediatedisothermal amplification,LAMP)技術(shù)相結(jié)合的方法,用于快速高效檢測金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)。同時(shí),采用人工污染金黃色葡萄球菌的速凍水餃和奶粉作為食品樣品,研究PMA-LAMP方法的檢測靈敏度。結(jié)果表明,PMA溶液質(zhì)量濃度3 μg/mL,650 W鹵素?zé)粝缕毓? min,PMA能夠完全抑制1.2×107 copies/mL金黃色葡萄球菌死菌核酸擴(kuò)增。PMA-LAMP方法能夠在恒溫65 ℃、60 min內(nèi)完成對亞致死型金黃色葡萄球菌特異性nuc基因的特異性檢測,其對亞致死狀態(tài)金黃色葡萄球菌的檢出限為34 CFU/mL,對食物樣品速凍水餃和奶粉的檢出限分別為17 CFU/mL和1.70×102 CFU/mL。建立的PMA-LAMP方法可以有效檢測亞致死態(tài)金黃色葡萄球菌,提供了一種新的檢測技術(shù)和解決方案。

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