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—— 中國食品雜志社
利用宏基因組文庫方法，通過功能篩選法從文庫中篩選到一個新型β-葡萄糖苷酶基因bgl2238（GenBank：KU320675.1），對新基因進行生物信息學分析和原核表達，并研究其酶學性質。結果表明，該基因全長2238bp，可編碼745個氨基酸，通過氨基酸序列分析，預測bgl2238蛋白分子質量為80.67kDa，pI值為4.95，是一種結構較穩(wěn)定、疏水性高且無信號肽序列的酸性蛋白質；經同源性分析，發(fā)現其與來源于Bacteroides thetaiotaomicron的β-葡萄糖苷酶具有58%的相似性，屬于GH3超家族和GH3C超家族酶。將重組質粒pET-32a（＋）-bgl2238轉化入Escherichia coli BL2l（DE3）細胞進行異源表達，酶學性質測定結果顯示，以對硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷（p-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside，pNPG）為底物，β-葡萄糖苷酶bgl2238最適反應pH值和溫度分別為6.10、44℃，此時該酶最大比活力達到29.1U/mg；且在4～50℃范圍內，熱處理β-葡萄糖苷酶bgl22384h后仍保留70%以上的酶活力，熱穩(wěn)定性較好；其動力學參數Vmax為576μmoL/（L·min），Km為0.296mmol/L；不同濃度的K＋、Na＋、Fe2＋、Mg2＋、Mn2＋、Ca2＋、Co2＋和Ni2＋對酶活力均有較大促進作用，其中Fe2＋對bgl2238酶活力的促進作用最大，10mmol/LFe2＋使相對酶活力高達260%，而重金屬離子Ag＋、Hg2＋及Cu2＋對酶活力有抑制作用。bgl2238具有良好的酶學性質，可以嘗試應用于工業(yè)上纖維素降解的生產。
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