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基于ATP再生體系快速檢測(cè)乳品中微生物
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 207 發(fā)表時(shí)間: 2019-09-26
作者: 常超,王凌,伍金娥,
關(guān)鍵詞: ATP再生|生物發(fā)光|快速檢測(cè)|乳品
摘要:

基于焦磷酸(pyrophosphoric acid,PPi)再生三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)建立乳品中微生物快速檢測(cè)方法。通過單因素試驗(yàn)優(yōu)化PPi再生ATP反應(yīng)條件,并考察方法的靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度和穩(wěn)定性。結(jié)果表明,PPi再生ATP最佳反應(yīng)條件為腺苷酰硫酸(adenosine phosphosulfate,APS)濃度10 μmol/L,ATP硫酸化酶(ATP sulfurylase,ATPS)活力0.15 U/mL、反應(yīng)pH7.8。在最佳的ATP再生條件下偶聯(lián)生物發(fā)光法,對(duì)ATP標(biāo)準(zhǔn)品、大腸桿菌、銅綠假單胞菌的檢測(cè)限分別為10-17mol/mL、102CFU/mL和102CFU/mL。工作曲線在102~107CFU/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,對(duì)乳品基質(zhì)的回收率為81.33%~97.78%,變異系數(shù)為14.24%~22.17%,與國標(biāo)平板計(jì)數(shù)法對(duì)比顯示兩種方法檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性良好,相關(guān)系數(shù)為0.96。本方法快速、簡單、靈敏、穩(wěn)定,適用于乳品中微生物快速監(jiān)測(cè)。

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