紅曲霉中mok E基因是紅曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物Monacolin K生物合成的一個(gè)相關(guān)基因,mok E基因表達(dá)量與Monacolin K產(chǎn)量呈正相關(guān)。以mok E基因?yàn)槟康幕颍瑯?gòu)建紅曲霉mok E基因過(guò)表達(dá)工程菌株,通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reverse transcription-quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)確定mok E基因過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)化子,對(duì)轉(zhuǎn)化子Monacolin K產(chǎn)量進(jìn)行測(cè)定,同時(shí)利用掃描電鏡,對(duì)野生型紅曲霉M1及轉(zhuǎn)化子菌絲、孢子進(jìn)行觀察。結(jié)果表明:以潮霉素抗性基因?yàn)楹Y選標(biāo)記,成功得到240?個(gè)轉(zhuǎn)化子,對(duì)其中9?個(gè)轉(zhuǎn)化子進(jìn)行mok E基因表達(dá)量測(cè)定,有3 株轉(zhuǎn)化子mok E基因表達(dá)量增加,分別為T(mén)2、T8、T9轉(zhuǎn)化子,確定其為mok E基因過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)化子;T2、T8、T9轉(zhuǎn)化子內(nèi)酯型Monacolin K產(chǎn)量分別為2?159.7、4?177.6、3?365.7?μg/g,與野生型紅曲霉Monacolin K產(chǎn)量(1 447.8 μg/g)相比,分別提高了49.2%、188.5%及132.5%。掃描電鏡結(jié)果顯示,mok E基因過(guò)表達(dá),對(duì)紅曲霉的菌絲體、孢子形態(tài)及生殖方式均有影響。
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