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—— 中國食品雜志社
目的：研究黑線鱈魚（Melanogrammus aeglefinus）皮膠原蛋白胰蛋白酶酶解多肽的抗氧化、抑制光損傷作用，提高魚皮的再利用價值。方法：利用單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計，探討黑線鱈魚皮膠原蛋白的最佳酶解工藝。將制得的酶解多肽通過基質(zhì)輔助激光解離飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜儀（matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight tandem mass spectrometry，MALDI-TOF MS/MS）測定多肽序列。利用Discovery Studio中CDOCKER模塊將所得的優(yōu)勢肽與抗氧化相關(guān)的Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白-1（Keap1）進(jìn)行分子對接。用不同質(zhì)量濃度的多肽預(yù)處理人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞（HaCaT）后，使用中波紫外線誘導(dǎo)HaCaT細(xì)胞構(gòu)建光損傷模型，通過超氧化歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活性、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量及細(xì)胞凋亡與周期來研究酶解多肽抑制光損傷的能力。結(jié)果：黑線鱈魚皮膠原蛋白在胰蛋白酶質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.23%、酶解溫度52.95?℃、酶解時間1.75?h條件下，水解度為78.33%。MALDI-TOF MS/MS測定出酶解液中的優(yōu)勢肽序列為V-IFFVTMGTP-R、L-SIVPV-R和L-MHT-T。通過分子對接發(fā)現(xiàn)V-IFFVTMGTP-R與Keap1結(jié)合最穩(wěn)定，從而預(yù)測其具有抗氧化的作用。用250?mg/mL酶解液處理光損傷的HaCaT細(xì)胞，其SOD、GSH-Px活性較模型組極顯著提高（P＜0.01），MDA含量極顯著降低（P＜0.01）。結(jié)論：黑線鱈魚皮膠原蛋白胰蛋白酶酶解多肽具有抗氧化活性，對光損傷具有一定的抑制作用。
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