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茶黃素雙沒食子酸酯的酶法合成條件優(yōu)化與純化
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 198 發(fā)表時(shí)間: 2019-09-26
作者: 吳光亮,劉新濤,胡冰,孫怡,曾曉雄
關(guān)鍵詞: 茶黃素雙沒食子酸|多酚氧化酶|酶法合成|純化
摘要:

利用皇冠梨多酚氧化酶催化表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和表兒茶素沒食子酸酯(epicatechin gallate,ECG)合成茶黃素雙沒食子酸酯(theaflavin-3,3’-O-digallate,TFDG),首先單因素試驗(yàn)確定了酶促反應(yīng)的底物EGCG/ECG物質(zhì)的量比3∶1、pH?4.0、反應(yīng)溫度35?℃,在此基礎(chǔ)上采用Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)法進(jìn)行3因素3水平響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn),確定了TFDG最優(yōu)酶促反應(yīng)條件為底物EGCG/ECG物質(zhì)的量比3.1∶1、pH?4.1、反應(yīng)溫度37?℃;在最優(yōu)反應(yīng)條件下進(jìn)行TFDG的合成,并利用AB-8層析柱結(jié)合高速逆流色譜技術(shù)分離純化反應(yīng)液,結(jié)果表明TFDG的得率和純度分別達(dá)到85.14%和97%。

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