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—— 中國食品雜志社
根據(jù)不同轉(zhuǎn)基因作物中cry1A基因的保守區(qū)序列，建立簡并聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）對轉(zhuǎn)cry1A基因作物檢測方法。cry1A基因（包括cry1Ab、cry1Ac、cry1Ab/Ac、cry1A.105、mcry1Ac）是抗蟲轉(zhuǎn)基因作物中使用頻次最高的目的基因，常用作轉(zhuǎn)基因成分篩選檢測的靶標。應用Vector NTI Advance 11.5軟件將已報道的20余種cry1A基因PCR檢測方法中的引物與11 個cry1A基因序列進行比對，結(jié)果顯示，這些方法的引物序列不能同時與所有cry1A基因序列完全配對，每對引物的錯配堿基數(shù)均大于3 個，且許多錯配發(fā)生在引物的3’端，表明這些cry1A基因檢測方法理論上僅適用于部分特定的靶標基因。在對MON810、Bt11、Bt176等11 種轉(zhuǎn)基因作物中cry1A基因核苷酸序列進行比對分析基礎上，以其5’端的保守核苷酸序列為模板，篩選到1 對簡并引物，建立了cry1A基因的簡并PCR方法。應用該方法能特異性地檢測11種轉(zhuǎn)基因作物中的cry1A基因，檢測靈敏度可穩(wěn)定達到0.1%。該方法為轉(zhuǎn)基因作物中cry1A基因的高效篩選檢測提供了一種新的技術手段。
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