從條斑紫菜中提取條斑紫菜多糖,對(duì)其總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)、蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)、3,6-內(nèi)醚半乳糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)、硫酸基質(zhì)量分?jǐn)?shù)、分子質(zhì)量和單糖組成進(jìn)行分析,并基于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的體外血管生成模型,研究條斑紫菜多糖對(duì)HUVECs的血管生成活性以及作用機(jī)制。采用噻唑藍(lán)法測(cè)定條斑紫菜多糖對(duì)HUVECs細(xì)胞活力的影響,黏附實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)測(cè)定其細(xì)胞黏附和細(xì)胞遷移能力,體外血管形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HUVECs的管腔形成數(shù)目,Western Blotting檢測(cè)經(jīng)多糖處理的HUVECs中E-鈣黏蛋白和N-鈣黏蛋白的表達(dá)水平,并通過(guò)絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)特異性抑制劑和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)受體酪氨酸激酶抑制劑探究其細(xì)胞遷移的作用機(jī)制。結(jié)果表明,條斑紫菜多糖的總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(77.48±2.62)%,蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(3.24±0.58)%,3,6-內(nèi)醚半乳糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(20.30±1.06)%,硫酸基質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(20.78±3.31)%。多糖的分子質(zhì)量為39.81 kDa,主要由半乳糖、3,6-內(nèi)醚半乳糖和硫酸基組成,是一種硫酸化半乳聚糖。條斑紫菜多糖在0~200 μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)對(duì)HUVECs無(wú)直接毒性且能夠促進(jìn)HUVECs模型中細(xì)胞增殖、黏附、遷移和血管網(wǎng)絡(luò)的形成;進(jìn)一步研究表明,條斑紫菜多糖主要通過(guò)c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)MAPK和VEGF受體信號(hào)通路介導(dǎo)E-鈣黏蛋白表達(dá)下調(diào)、N-鈣黏蛋白表達(dá)上調(diào),促進(jìn)細(xì)胞血管生成。綜上所述,條斑紫菜多糖能夠促進(jìn)HUVECs血管生成,為其開(kāi)發(fā)新型的促血管生成營(yíng)養(yǎng)因子和以精準(zhǔn)營(yíng)養(yǎng)為導(dǎo)向的條斑紫菜精深加工和高值利用奠定科學(xué)理論基礎(chǔ)。
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