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—— 中國食品雜志社
為明晰糠硫醇生物轉化機制，將來源于釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）G20的胱硫醚β-裂解酶（cystathionine β-lyase，Str3p）在大腸桿菌（Escherichia coli）中實現(xiàn)異源表達，并驗證其催化性質。正交設計試驗優(yōu)化大腸桿菌基因工程菌蛋白表達的誘導條件，其最適誘導表達條件為誘導溫度20 ℃、異丙基硫代半乳糖苷濃度0.5 mmol/L、誘導時間13 h。該條件下獲得的菌體經超聲破碎和鎳柱親和層析，純化得到的可溶性Str3p分子質量約為52 kDa，其表達量達1.26 mg/mL，較優(yōu)化前的表達量和酶活力分別提高41.7%和38.6%。實驗發(fā)現(xiàn)Str3p能夠催化裂解半胱氨酸-糠醛加合物生成糠硫醇，且催化過程受pH值影響較大，在pH 8.0時糠硫醇產量達到47 μmol/L。本研究確定Str3p在E.coli BL21中的異源表達及催化特性，為生物轉化合成天然糠硫醇提供新的參考途徑。
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